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Allegato B

PROTOCOLLO “TIPO” PER PRELIEVI • etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda
di campionamento e la data
DI CAMPIONI BIOLOGICI DA CANIDI • conservare in congelatore

Il protocollo fornisce indicazioni sui prelievi da effettuarsi che CAMPIONI DI PELI PRELEVATI DA ANIMALI VIVI O DA CARCASSE
potranno essere integrati con altri definiti da Istituti Zooprofilattici • indossare guanti di lattice da laboratorio (per evitare contaminazioni)
in sede regionale o da laboratori di genetica.
• prelevare un ciuffo di almeno 20 peli con radice (controllare che i bulbi
siano stati prelevati)
CAMPIONI DI SANGUE PRELEVATI DA ANIMALI VIVI SEDATI • trasferire ciascun ciuffo in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente
(a cura del Veterinario) utilizzare vacutainer con anticoagulante EDTA 4 ml di ETANOLO o SILICA GEL
(NON utilizzare vacutainer con eparina) • etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda
• prelevare circa 2-3 cc di sangue per ogni individuo di campionamento e la data
• trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente • conservare in congelatore
4 ml di LONGBUFFER • l’estrazione del DNA da peli è problematica, quindi, quando possibile,
• trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente prelevare campioni di sangue o tessuto
4 ml di LONGBUFFER
• trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente
4 ml di LONGBUFFER DOCUMENTAZIONE FOTOGRAFICA
• mischiare sangue e buffer agitando le provette Si raccomanda di fotografare, se possibile, ogni animale vivo o carcassa,
• etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda visualizzando, in particolare, ogni carattere morfologico che possa risultare
di campionamento e la data anomalo (colore del mantello; mascherina facciale, colorazione delle zampe,
• conservare in frigorifero (massimo per un mese), oppure conservare in polpastrelli, eventuali unghie bianche, eventuale sperone nelle zampe
congelatore posteriori, coda, orecchie, dentatura…) e che possa indicare ibridazione
fra lupo e cane domestico.
Le foto digitali potranno essere messe a disposizione degli Istituti
CAMPIONI DI TESSUTI PRELEVATI DA CARCASSE Zooprofilattici e dei laboratori di riferimento, identificando con precisione
• prelevare due frammenti di tessuto muscolare, ciascuno di circa 1 cm cubo, a quali campioni biologici corrispondano.
da ogni individuo
• il prelievo deve essere fatto con forbici o bisturi puliti alla fiamma
per evitare contaminazioni
• se la carcassa è in cattivo stato di conservazione, prelevare dai tessuti
meno decomposti
• trasferire ciascun frammento in 1 provetta eppendorf da 5 m contenente
4 ml di ETANOLO o SILICA GEL

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