Page 32 - VademecumLUPOperWebCC
P. 32

Allegato B

              PROTOCOLLO “TIPO” PER PRELIEVI                                                  •  etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda
                                                                                                di campionamento e la data
              DI CAMPIONI BIOLOGICI DA CANIDI                                                 •  conservare in congelatore



       Il protocollo fornisce indicazioni sui prelievi da effettuarsi che                     CAMPIONI DI PELI PRELEVATI DA ANIMALI VIVI O DA CARCASSE
       potranno essere integrati con altri definiti da Istituti Zooprofilattici               •  indossare guanti di lattice da laboratorio (per evitare contaminazioni)
       in sede regionale o da laboratori di genetica.
                                                                                              •  prelevare un ciuffo di almeno 20 peli con radice (controllare che i bulbi
                                                                                                siano stati prelevati)
       CAMPIONI DI SANGUE PRELEVATI DA ANIMALI VIVI SEDATI                                    •  trasferire ciascun ciuffo in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente
       (a cura del Veterinario) utilizzare vacutainer con anticoagulante EDTA                   4 ml di ETANOLO o SILICA GEL
       (NON utilizzare vacutainer con eparina)                                                •  etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda
       •  prelevare circa 2-3 cc di sangue per ogni individuo                                   di campionamento e la data
       •  trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente                •  conservare in congelatore
         4 ml di LONGBUFFER                                                                   •  l’estrazione del DNA da peli è problematica, quindi, quando possibile,
       •  trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente                  prelevare campioni di sangue o tessuto
         4 ml di LONGBUFFER
       •  trasferire 1 ml di sangue in 1 provetta eppendorf da 5 ml contenente
         4 ml di LONGBUFFER                                                                   DOCUMENTAZIONE FOTOGRAFICA
       •  mischiare sangue e buffer agitando le provette                                      Si raccomanda di fotografare, se possibile, ogni animale vivo o carcassa,
       •  etichettare le provette; riportare l’identificazione nella scheda                   visualizzando, in particolare, ogni carattere morfologico che possa risultare
         di campionamento e la data                                                           anomalo (colore del mantello; mascherina facciale, colorazione delle zampe,
       •  conservare in frigorifero (massimo per un mese), oppure conservare in               polpastrelli, eventuali unghie bianche, eventuale sperone nelle zampe
         congelatore                                                                          posteriori, coda, orecchie, dentatura…) e che possa indicare ibridazione
                                                                                              fra lupo e cane domestico.
                                                                                              Le foto digitali potranno essere messe a disposizione degli Istituti
       CAMPIONI DI TESSUTI PRELEVATI DA CARCASSE                                              Zooprofilattici e dei laboratori di riferimento, identificando con precisione
       •  prelevare due frammenti di tessuto muscolare, ciascuno di circa 1 cm cubo,          a quali campioni biologici corrispondano.
         da ogni individuo
       •  il prelievo deve essere fatto con forbici o bisturi puliti alla fiamma
         per evitare contaminazioni
       •  se la carcassa è in cattivo stato di conservazione, prelevare dai tessuti
         meno decomposti
       •  trasferire ciascun frammento in 1 provetta eppendorf da 5 m contenente
         4 ml di ETANOLO o SILICA GEL



       32                                                                                                                                                        33
   27   28   29   30   31   32   33   34   35   36   37